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사용처
Lactobacilli MRS Agar와 Lactobacilli MRS Broth는 Lactobacillus 종의 분리, 계수 그리고 배양에 사용할 것을 추천한다.
요먁 및 설명
Lactobacilli MRS Agar와 Lactobacilli MRS Broth는 deMan, Rogosa와 Sharpe의 조성에 기초한다. 이들 배지는 구강, 분변, 유제품과 다른 것으로부터 모든 lactobacilli의 풍부한 성장을 지지한다고 저자들에 의해서 밝혀졌다.
실험 원리
Lactobacilli MRS Agar와 Lactobacilli MRS Broth는 peptone과 dextrose를 포함한다. 이들 성분들은 질소, 탄소와 다른 성장에 필요한 요소를 제공한다. Polysorbate 80, acetate, magnesium과 manganese는 다양한 lactobacilli를 배양하기 위한 성장요소를 제공한다. 위 성분들은 lactobacilli를 제외한 일부 균들의 성장을 억제할 수 있다.
분말제품으로부터 배지를 만드는 방법
1. 증류수 1L에 분말을 녹인다.
Lactobacilli MRS Agar 70g
Lactobacilli MRS Broth 55g
완전히 혼합한다.
2. 수시로 저어주면서 가열하고 분말을 완전히 녹이기 위해서 1분간 끓인다.
3. 121℃, 15분간 고압증기멸균한다.
4. 신뢰할 수 있고, 전형적인 대조 배양물을 사용해서 최종 제품 샘플의 성능을 시험한다.
시험절차
Direct Counts
1. lactobacilli의 직접 계수를하기 위해서, 살균하고, 녹인(45-50℃) Lactobacilli MRS Agar 15-20ml을
살균한 페트리디쉬에 희석한 시험샘플 1ml과 같이 붓는다.
2.. 한 방향으로 그런 다음 역방향으로 플레이트를 돌려주면서 배지 전체에 접종물을 분주한다.
3. 5-10분동안 평평한 표면에서 배지가 굳도록 한다.
4. 대신에, Lactobacilli MRS Agar 플레이트는 획선 접종법을 사용해서 균의 직접 회복에 사용할 수 있다.
5. 플레이트를 35℃, 3일간 혹은 30℃, 5일간 이산화탄소가 충진된 호기 조건에서 배양한다.
Broth Enrichment
1. 샘플은 Lactobacilli MRS Broth에 직접 접종할 수 있다.
2. 액체 배지 시험관은 35℃, 3일간 혹은 30℃, 5일간 호기 조건에서 배양한다.
적당한 평판배지에 시험관의 배양물을 계대배양한다.
기대되는 결과
Lactobacilli는 Lactobacilli MRS Agar에 묻혀 크고, 흰색 집락으로 보이고 혹은 Lactobacilli MRS Broth에선 탁도로 나타난다. 성장물은 추가적인 시험 절차를 위해서 적당한 배지에서 계대배양해야한다. Lactobacillus 종의 배양을 위해 추천하는 적당한 참고문헌을 참고한다. |
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