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사용처
Fluid Thioglycollate Medium과 NIH Thioglycollate Broth/Sterility Test Broth는 USP 규격에 부합한다.
Fluid Thioglycollate Medium (FTM)은 생물학적 약제의 멸균 시험과 혐기성, 호기성 및 미호기성 균의 배양에 사용된다.
NIH Thioglycollate Broth와 Sterility Test Broth(USP Alternative Thioglycollate Medium)는 FTM을 대신해서 멸균 시험에 사용될 수 있다.
Thioglycollate Medium, Brewer Modified는 절대 혐기성 균, 미호기성 균과 통성 혐기성 균의 배양에 사용된다.
Fluid Thioglycollate Medium with Beef Extract는 일반적으로 살균된 생물학적 제품으로부터 세균을 배양하는데 사용된다.
Thioglycollate Medium without Dextrose와 Thioglycollate Medium(Fluid), without Dextrose 혹은 (Eh) Indicator는 혐기성 균의 발효 실험을 위한 기초배지로 뿐만 아니라, 일반적으로 살균된 제료, 특히 수은 방부제를 포함하는 것에서 세균을 검출하는데 사용된다.
Thioglycollate Medium without Indicator(135C)는 임상 검체와 다른 재료들로부터 굉장히 다양한 세균의 회복, 특히 절대 혐기성 균을 위한 일반적인 증균 목적의 배지이다.
Fluid Thioglycollate Medium, Enriched 와 Enriched Thioglycollate Medium은 다양한 임상 및 비임상 검체들로부터 까다로운(복잡한 영양 요구성) 균뿐만 아니라 호기성 세균 및 혐기성 세균을 포함해서 까다롭지 않은 균의 배양을 위한 정성 실험에 사용되는 일반적인 목적의 배지이다.
sodium bicarbonate 혹은 marble chip이 들어간 Enriched Thioglycollate Medium은 혐기성 균의 항균제 감수성 시험을 위한 성장법에 의한 표준화된 접종물을 만드는데 사용된다.
Thioglycollate Medium with Calcium Carbonate와 Thioglycollate Medium, Enriched with Calcium Carbonate는 보관용 배양물을 유지하는데 추천된다.
요약 및 설명
Quastel과 Stephenson은 -SH 그룹(cysteine, thioglycollic acid, glutathione)을 포함하는 적은 량의 화합물의 존재가 tryptic digest broth에서 Clostridium sporogenes의 "호기적" 성장을 허락한다는 것을 발견했다.
Falk, Bucca와 Simmons는 생물학적 약제의 멸균 시험 동안 오염원을 검출하는데 적은 량의 agar(0.06-0.25%)를 사용하는 것에 대한 장점을 지적했다. 적은 량의 agar와 감소된 기질을 조합하는 것에 대한 가치는 Brewer에 의해 증명되었다. Brewer의 실험은 0.05%의 agar가 들어간 액체 배지에서 혐기성 균은 sodium thioglycollate의 존재 혹은 부재에서 동일하게 잘 자랐다는 것을 보여주었다. Marshall, Gunnish와 Lexen은 수은 방부제의 존재시 Brewer의 Thioglycollate Medium에서 혐기성 균의 만족스러운 배양에 대해 보고하였다. Nungester, Hood 와 Warren, 그리고 Portwood는 sodium thioglycollate에 의한 수은 화합물의 세균발육억제 효과의 중화를 확인했다. casein peptone의 편입은 Vera에 의해 소개되었다. Malin과 Finn은 thioglycollate가 들어간 일반적으로 사용된 배지가 탄수화물의 존재시 몇몇 균을 억제한다고 보고했다. 1941년, NIH는 멸균 시험에 2 가지 thioglycollate media 사용을 지정하였다, Brewer 조성과 Linden 조성.
Linden 조성은 meat infusion이 plant(soy) peptones로 대체된 Modified Brewer Thioglycollate Medium으로 나중에 언급되었다.
Fluid Thioglycollate Medium은 식품을 조사하고, 살균제의 페놀 계수와 포자를 죽이는 효과를 결정하는 것에 대해 FDA Bacteriological Analytical Mannual (BAM)과 AOAC International의 Official Methods of Analysis에서 추천되었다. Fluid Thioglycollate Medium은 저장된 혈액에 대한 멸균성 확인을 하는데에 지정되었다. 이것은 살균된다고 알려진 논문의 멸균 시험에 사용하도록 USP에 추천된 배지들 중 하나이기도 하다: 이들 조성은 USP 성장 촉진 시험의 요구조건에 부합한다.
USP Alternative Thioglycollate Medium인 NIH Thioglycollate Broth와 Sterility Test Broth는 agar 혹은 지시제 성분이 없는 Fluid Thioglycollate Medium이다. 이들은 호기 배양보다는 혐기 배양이 추천되는 것을 제외하고는 동일한 멸균 시험 절차에 사용된다. 이들은 USP 성장 촉진 시험의 요구 조건에도 부합한다.
Fluid Thioglycollate Medium with Beef Extract는 생백신에서 생명력있는 균을 검출하는 것에 대해서, USDA의 Animal and Plant Health Inspection Service에 의해 추천된다. Thioglycollate Medium without Dextrose와 Thioglycollate Medium without Dextrose 혹은 지시제는 발효 연구에서 첨가된 탄수화물과 함께 사용될 수 있다.
Thioglycollate Medium without Indicator (135C)는 지시제가 없다는 것이 균에게 가능한 독성을 피하기 때문에 진단 연구에 선택되는 배지이다. 이 배지는 성장 중 초기 생존능력을 가지고 있어 최소 접종을 지지한다.
도말 배지를 지지하기 위한 증균 배지로 사용될 때, thioglycollate media에는 종종 hemin과 vitamin K가 첨가된다. Fluid Thioglycollate Medium, Enriched는 vitamin K와 hemin이 첨가된 BBL Fluid Thioglycollate Medium이다. Enriched Thioglycollate Medium은 vitamin K와 hemin이 첨가된 BBL Thioglycollate Medium without Indicator-135C이다. 영양분이 강화된 액체 배지는 임상 재료에 존재하는 까다롭거나 성장이 느린, 절대 혐기성 균의 분리와 배양에 사용할 것을 추천한다. 이들은 광범위한 호기성 균과 통성 혐기성 균의 분리와 배양에도 추천된다. Enriched Thioglycollate Medium은 CDC 추천에 따라 혐기성 윗 공간을 만들고 스크루 뚜껑으로 된 시험관에 제공된다. Vitamin K와 hemin은 성장을 위해서 특정 혐기성 균에 의해 요구되는 것으로 밝혀졌다. 탄산칼슘의 첨가는 성장하는 동안 생산된 산을 중화함으로써 보관용 배양물의 유지를 강화한다. 혐기성 균의 감수성 시험을 위한 접종물을 만드는 것에 대해 NCCLS에 의해 추천된 Enriched Thioglycollate Medium(Broth)는 시험균이 성장하는 동안 생산된 산을 중화시키기 위해서 1mg/mL의 중탄산나트륨 혹은 marble chip이 첨가된 Enriched Thioglycollate Medium(1㎍/mL의 Vitamin K와 5㎍/mL의 hemin이 들어간 Thioglycollate Medium without Indicator [135])이다.
분말 제품으로부터 배지 만드는 방법
1. 증류수 1L에 분말을 녹인다.
Difco Fluid Thioglycollate Medium - 29.8g
BBL Fluid Thioglycollate Medium - 29.5g
2. 수시로 저어주면서 가열하고 분말을 완전히 용해시키기 위해서 1분간 끓인다.
3. 각 배지를 위한 라벨상의 사용방법에 따른다.
4. 121℃, 15분간 고압증기멸균하거나 라벨상의 지시에 따른다.
5. Fluid thioglycollate media는 15-30℃에서 보관한다. 만일 배지의 30% 이상이 사용하기 전에 분홍색이면, 흡수된 산소를 빼내기 위해서 다시한번 (100℃) 재가열한다.
6. 신뢰할 수 있고, 전형적인 대조 배양물을 사용해서 최종 제품 샘플의 성능을 시험한다.
주의
배지는 한번 이상 재가열하지 않는다; 계속된 재가열은 독성이 생기게 한다. |
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