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사용처
이들 배지는 USP 규격에 부합한다.
Antibiotic Assay Media는 세균 분석법에 의해 항생제의 유효성을 결정하는데 사용된다.
요약 및 설명
항생제의 활성(유효성)은 적당한 조건하에서 세균에 대한 억제 효과로 검증될 수 있다. 항균제의 활성 감소는 화학적 방법에 의해 검증되지 않은 변화를 나타낼 수 있다. 항생제 분석은 실린더 플레이트법(cylinder plate method)과 탁도 시험관법(turbidimetric "tube" assay)으로 한다. 페니실린 분석을 위해서 Abraham et al.에 의해 처음 기술된 실린더 플레이트법은 Foster와 Woodruff 그리고 Schmidt와 Moyer에 의해 나중에 변형되었다.
Antibiotic assay media는 USP, European Pharmacopia와 AOAC International의 규격에 따라 만들어졌다. Antibiotic media는 Assay Methods of Antibiotics에서 Grove와 Randall에 의해 할당된 숫자상의 이름으로 식별된다. Antibiotic Medium 19는 Outline of Details for Official Microbiological Assays of Antibiotics에서 기술된 용법에 부합한다.
Antibiotic Medium 12는 Grove와 Randall의 조성으로 만들어졌다. 그들은 항곰팡이제, nystatin과 anisomycin에 대한 , 시험균으로 Saccharomyces cerevisiae가 들어있는 seed layer에만 사용하는, 실린더 플레이트 분석법을 위한 시험용 플레이트를 만드는데 사용할 것을 추천했다.
Antibiotic Medium 1과 Antibiotic Medium 4는 지방이 없는 분유에서 페니실린을 검출하기 위한 실린더 플레이트법에 사용된다.
표준화된 배양 배지의 사용과 모든 시험조건에 대한 조심스러운 조절은 만족스러운 시험 결과를 얻기 위해서 항생제에 대한 세균 분석법에서 기본이 되는 필수조건이다.
실험 원리
실린더 플레이드 법
이 방법은 접종된 평판배지 표면에 위치시킨 실린더로부터 항생제 용액이 확산되는 것에 기초한다. 배양 후 억제 구역의 직경은, 부분적으로, 항생제의 농도와 활성에 따라 결정된다. 이 방법은 항생제의 상품화된 조제품에 대한 분석뿐만아니라 체액, 동물 사료와 다른 재료들에 있는 항생제를 정량적으로 결정하는데 사용된다.
탁도 분석법
탁도법은 균일한 용액의 항생제가 들어있는 액체 배지에서 세균 배양물의 성장이 억제되는 것에 기초한다. 탁도 결정은 짧은 배양 기간이 요구된다는 장점을 가지고 있다. 3-4시간 후 시험결과를 제공한다. 그러나 용매나 다른 억제 물질이 있을 때 실린더 플레이트법보다 더 확실하게 탁도 분석법이 영향을 받을 수 있다. 이 방법은 시험 샘플이 분명할 때만 사용하는 것이 적절하다.
분말제품으로부터 배지 만드는 방법
1. 증류수 1L에 분말을 녹인다.
Antibiotic Medium 1 - 30.5g
Antibiotic Medium 2 - 25.5g
Antibiotic Medium 3 - 17.5g
Antibiotic Assay Broth(Antibiotic Medium 3) - 17.5g
Antibiotic Medium 4 - 26.5g
Antibiotic Medium 5 - 25.5g
Antibiotic Medium 8 - 25.5g
Antibiotic Medium 9 - 50g
Antibiotic Medium 10 - 52g
Antibiotic Medium 11 - 30.5g
Antibiotic Medium 12 - 62.5g
Sabourand Liquid Broth, Modified(Antibiotic Medium 13) - 30g
Antibiotic Medium 19 - 60g
철저히 혼합한다.
2. 수시로 저어주면서 가열하고 분말을 완전히 용해시키기 위해서 1분간 끓인다.
3. 121℃, 15분간 고압증기멸균한다.
4. Antibiotic Medium 11의 pH를 8.3±0.1까지 올리기 위해서, 배지를 45-50℃까지 식히고 NaOH를 넣는다.
5. 신뢰할 수 있고, 전형적인 대조 배양물을 사용해서 최종 제품 샘플의 성능을 시험한다. |
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